クッシング症候群が疑われる症例に対して午前中安静時にACTH、血中コルチゾールを測定する。ACTH低値かつコルチゾール低値の場合は医原性クッシング症候群が疑われる。ACTH低値かつコルチゾール正常～高値の場合は副腎性クッシング症候群、ACTH正常～高値かつコルチゾール正常～高値の場合は異所性ACTH産生腫瘍やクッシング病が疑われるためデキサメタゾン（DEX）抑制試験、コルチゾール日内変動などを評価する。